एचआरपी संयुग्मित अरचिस हाइपोगिया लेक्टिन (मूंगफली) -पीएनए

सार

मूंगफली (अरचिस हाइपोगिया) एग्लूटीनिन (पीएनए) का व्यापक रूप से ट्यूमर मार्कर के रूप में उपयोग किया जाता है क्योंकि यह कैंसर विशिष्ट टी एंटीजन (गैल्बेटा1–>3गैलएनएसी-) को दृढ़ता से पहचानता है, लेकिन इसके सियालेटेड संस्करण को नहीं। हालाँकि, Galbeta1–>4GlcNAc (LacNAc) के प्रति एक अतिरिक्त विशिष्टता, जो ट्यूमर विशिष्ट नहीं है, को PNA के लिए जिम्मेदार ठहराया गया था। लेक्टिन हिस्टोकेमिकल परिणामों की सही व्याख्या के लिए हमने प्राकृतिक रूप से पाए जाने वाले या अर्ध-सिंथेटिक ग्लाइकोप्रोटीन, मैट्रिक्स-इमोबिलाइज्ड गैलेक्टोसाइड्स और लेक्टिन-बाइंडिंग टिशू ग्लाइकोप्रोटीन का उपयोग करके पीएनए चीनी विशिष्टता की जांच की, बजाय मोनो- या डिसैकराइड को लिगैंड के रूप में। घुलनशील ग्लाइकोकोनजुगेट्स के डॉट-ब्लॉट्स, ट्रांसफर ब्लॉट्स या पॉलीस्टाइन प्लेट कोटिंग्स को पीएनए के हॉर्स-मूली पेरोक्सीडेज (एचआरपी) संयुग्म और ज्ञात विशिष्टता के अन्य व्याख्यान के साथ जांचा गया था। पीएनए-बाध्यकारी ग्लाइकोप्रोटीन के संशोधन, ओ-लिंक्ड ऑलिगोसेकेराइड्स के चयनात्मक निष्कासन और ग्लाइकोसिडेस के साथ उपचार सहित पता चला कि गैल्बेटा1–>4GlcNAc (LacNAc) अप्रभावी था, जबकि टर्मिनल अल्फा-लिंक्ड गैलेक्टोज (TAG) के साथ-साथ उजागर टी एंटीजन (Galbeta1–>3 GalNAc-) चीनी के रूप में उत्कृष्ट था। पीएनए द्वारा उनकी मान्यता के लिए ग्लाइकोप्रोटीन में मात्रा। स्थिर होने पर, पीएनए बाइंडिंग में मेलिबियोज लैक्टोज से बेहतर था। TAG-विशिष्ट मानव सीरम एंटी-अल्फा-गैलेक्टोसाइड एंटीबॉडी का उपयोग करके परिणामों की पुष्टि की गई।

उत्पाद को 4 डिग्री सेल्सियस पर स्टोर करें यदि दो सप्ताह के भीतर तुरंत उपयोग किया जाना है। लंबी अवधि के भंडारण के लिए, बार-बार ठंड और विगलन से बचने के लिए विभाज्य और प्राप्ति के 6 महीने बाद स्टोर करें। तत्काल उपयोग से पहले आवश्यक मात्रा को पतला करें। परख बफर में और अधिक कमजोर पड़ने किया जा सकता है। टिप्पणियाँ: सोडियम एजाइड पेरोक्साइड का एक प्रबल अवरोधक है और इसे एचआरपी संयुग्मों में नहीं जोड़ा जाना चाहिए। उत्पाद की अधिकतम वसूली के लिए, विगलन के बाद और टोपी को हटाने से पहले मूल शीशी को सेंट्रीफ्यूज करें।
अन्य नोट
Arachis hypogaea लेक्टिन शीशियों की छोटी मात्रा कभी-कभी शिपमेंट और भंडारण के दौरान उत्पाद शीशी की मुहर में फंस जाती है। यदि आवश्यक हो, तो कंटेनर की टोपी में किसी भी तरल को हटाने के लिए शीशी को टेबलटॉप अपकेंद्रित्र पर संक्षेप में अपकेंद्रित्र करें। कुछ उत्पादों को सूखी बर्फ के साथ भेजने की आवश्यकता हो सकती है और अतिरिक्त शुष्क बर्फ शुल्क लागू हो सकता है।
लेक्टिंस ग्लाइकोकोनजुगेट्स के साथ अवक्षेपित होते हैं और ऑलिगोसेकेराइड्स को समान चीनी रचनाओं जैसे गैलेक्टोज, मैनोज या ग्लूकोज के साथ पहचानने या अलग करने के लिए उपयोगी होते हैं। 

Arachis hypogaea (PNA, मूंगफली एग्लूटीनिन), 110kD, लगभग 27kD प्रत्येक के चार समान सबयूनिट्स से बना है, गैलेक्टोज-विशिष्ट है, जिसमें मजबूत एंटी-टी-एंटीजन गतिविधि है। टी-एंटीजन कई ग्लाइकोकोनजुगेट्स जैसे एम और एन रक्त समूहों, गैंग्लियोसाइड्स, और कई अन्य घुलनशील और झिल्ली से जुड़े ग्लाइकोप्रोटीन और ग्लाइकोलिपिड्स में मौजूद है। पीएनए सामान्य मानव एरिथ्रोसाइट्स को एकत्रित नहीं करता है, लेकिन दृढ़ता से न्यूरोमिनिडेस-उपचारित लाल रक्त कोशिकाओं को एग्लूटीनेट करता है। Ca++ की उपस्थिति रिसेप्टर्स के लिए PNA के बंधन को बढ़ा सकती है। एशियालो जीएम1 गैंग्लियोसाइड को पीएनए के लिए एक प्रमुख कोशिका सतह रिसेप्टर भी माना जाता है। पीएनए संक्रमणकालीन म्यूकोसा विकृतियों के लिए सामान्य और ट्यूमर ऊतक निर्धारण में उपयोगी है।

 

 

 

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